Dvojitý hybrid

Dvojitý hybridní technika je biologie technikou molekulární detekce fyzikální interakci mezi dvěma proteiny .

Tato technika je následující: test protein (jako je Gal4 je použit), jehož jeden konec lze připojit k aktivační sekvencí, a ostatní aktivuje transkripci z reporterového genu (například lacZ ) umístěna pod kontrolu této sekvence . Tím, genetického inženýrství , dva hybridní proteiny jsou pak syntetizovány: jedna se skládá z jednoho konce testovaného proteinu fúzovaného s prvním proteinu, druhý vytvořený na druhém konci kondenzovaný na jiný proteinu.. Pokud tyto dva proteiny interagují fyzicky, tyto dva hybridy se spojí a umožní transkripci reportérového genu.

Tato technika však může selhat kvůli manipulacím prováděným s proteiny a vyžaduje četné kontroly. Reciprocita je navíc systematicky testována, to znamená, že fúze dvou sledovaných proteinů se dvěma konci testovaného proteinu jsou obráceny. Poté zkontrolujeme, zda dostaneme stejný výsledek.

Podívejte se také