Legionella

Legionella Popis tohoto obrázku, také komentován níže Kultura Legionella sp. pod UV Klasifikace
Panování Bakterie
Větev Proteobakterie
Třída Gama proteobakterie
Objednat Legionellales
Rodina Legionellaceae

Druh

Legionella
Brenner et al. , 1979

Bakterie rodu Legionella , Legionella , jsou bacily gramnegativní .

Ekologie

Jedná se o bakterie přirozeně se vyskytující ve vodě a kalech , odpovědné za respirační onemocnění , legionelózu . Často kolonizují vodní sítě, zejména sítě teplé vody , klimatizační zařízení a vzduchové chladicí věže (TAR).

Podmínky šíření

Legionella se vyvíjí a množí:

Legionella se slabě množí pod 20  ° C , přestává se reprodukovat při 55  ° C a je zničena od 60  ° C (podle velmi přesné doby kontaktu) pro okamžité zničení od 70 - 74  ° C .

Podmínky nezbytné pro kontaminaci

Přítomnost legionel ve vodě není dostatečným stavem k vyvolání onemocnění. Musí být přítomny tři faktory:

Po požití kontaminované vody nebyl diagnostikován žádný případ legionelózy , ani nedošlo k žádnému přenosu z člověka na člověka. Zdá se, že množství bakteriálního inokula neovlivňuje vývoj legionelózy. Nakonec byly usvědčeny klimatické faktory (silné deště a vlhkost, oživení případů v létě).

Kromě toho jsou pro vývoj onemocnění vyžadovány faktory citlivosti související s lidským hostitelem, i když v současnosti nejsou plně pochopeny. Lze však individualizovat rizikové faktory: pokročilý věk, deficit imunity (rakovina / onemocnění krve, cukrovka), ale především kouření. Infekce je výjimečně popsána u dětí.

Při analýzách vody nesmí být překročeny mezní hodnoty nebo mezní hodnoty

Prahovou hodnotu která nesmí být překročena, je 1000  CFU / litr z Legionella pneumophila pro ohřev teplé užitkové vody (TUV) a pro chlazení vzduchu věže (TAR), nová AFNOR NF T90-431 standard listopadu 2014, revidovaná v srpnu 2017 . Pro ART jsou nastaveny 3 prahové hodnoty: <1000  CFU / l  ; mezi 1 000 a 100 000  CFU / l a> 100 000  CFU / l . Poslední 2 prahové hodnoty vyžadují léčebné akce ze strany operátora. Nakonec lze výsledky vykreslit ve formě Interfering Flora.

Odhaduje se, že v Evropě je 90% legionelózy spojeno s druhem L. pneumophila a že v průměru 85% je výlučně způsobeno séroskupinou 1. Séroskupiny 2 až 15 sdílejí zbývajících 10%. Naopak v Austrálii je za většinu případů legionelózy odpovědný druh longbeachae . Nakonec existuje 51 dalších druhů z rodu Legionella, který se běžně nazývá Legionella spp a jehož infekční riziko je diskutováno hygieniky a specialisty na infekční choroby. Přítomnost Legionella spp však ukazuje, že síťové podmínky jsou optimální pro množení legionel, a tedy potenciálně Legionella pneumophila .

Existuje cca 6.000  případy, za rok v Evropě a mezi 1200  případů a 1600 případů ročně ve Francii s úmrtností v rozmezí mezi 10 a 15% navzdory odpovídající léčbě antibiotiky (143 úmrtí na 1,262  případů hlášeno v roce 2013 a vývoj, který je znám pouze pro 1 168  případů , tj. letalita 12,2%) (fluorochinolony nebo makrolidy).

Ekologie legionel

Legionella jsou hydro-telluric původ. Jejich přirozené prostředí představuje přírodní nebo umělé vodní prostředí. Zůstává tam mimo jiné v biofilmech (organické a mikroorganické zbytky vytvořené v potrubích a na povrchu stojaté vody), které jej chrání před chlorací a zdá se, že hrají důležitou roli pro jeho přežití v zařízeních. Vyskytuje se také v biofilmech domácích vodních systémů, někdy spojených s Pseudomonas aeruginosa . Vedle povahy vody (kyselost, mineralizace, organická hmota a obsah živin) hraje při tvorbě biofilmů důležitou roli také teplota a typ materiálů používaných ve vodovodní instalaci.

Biofilm se vyvíjí zejména v:

Kromě toho, sladkovodní prvoci (včetně améby ) představují přirozenou hostitele Legionella, ve kterém se provádí fáze jeho životního cyklu. Bakterie a jeho hostitel zažili evoluce konvergentní umožňuje bakterií získaných v jeho genetickou výbavou z genů kódujících většinu faktorů virulence legionelou. Chování a virulence legionel v jejich mikrobiálním prostředí je stále špatně pochopeno (například jejich schopnost napadnout určité prvoky) a améba i samotné jejich prostředí: zejména ekosystém biofilmů, interakce s jinými druhy, vodní turbulence v sítích  atd. Tyto Anses řekl v roce 2011, že „sledování prvoky (améby a nálevníky) v zařízeních a jejich příspěvek k nebezpečnosti vybavení Riziko je příliš velké části zanedbávány“ .

Rizika

Legionelóza se může projevit ve dvou odlišných klinických formách:

Nozokomiální infekce se podílí na 1 až 10% případů nosokomiální pneumonie.

Infekční cyklus L. pneumophila

Legionella pneumophila je schopna infikovat vodní améby i alveolární makrofágy a pneumocyty lidí po podobném infekčním cyklu.

Při kontaktu s hostitelskou buňkou (amébou nebo makrofágy) používá L. pneumophila svůj hlavní faktor virulence: svůj sekreční systém typu IV Dot / Icm. Tento systém umožní bakteriím vstříknout přímo do cytoplazmy svého hostitele více než 300 bakteriálních proteinů nazývaných efektory. Tyto proteiny umožní bakterii odklonit různé buněčné mechanizmy svého hostitele ve svůj prospěch.

Některé z těchto efektorů jsou zapojeny do mechanismů vstupu do hostitelské buňky únosem procesů makropinocytózy nebo fagocytózy. Tyto bakteriální proteiny jsou také nezbytné pro to, aby bakterie unikly degradaci endozomální cestou hostitele, zejména SidK efektoru. Podílejí se také na tvorbě replikační vakuoly pro bakterii, nazývané LCV pro vakuolu obsahující legionellu, která je charakterizována zejména náborem vezikul pocházejících z endoplazmatického retikula. Do tohoto procesu je zapojeno mnoho efektorů systému Dot / Icm: SidM / DrrA, SidC, RalF, LepB atd. Takto maskovaný v LCV bude legionella schopen exponenciálně se množit, dokud nevyčerpá všechny dostupné výživové zdroje. Tento nedostatek pak spouští přeprogramování genetické exprese bakterie, která poté vyjadřuje její faktory virulence (zejména efektory sekrečního systému typu IV) a faktory mobility (bičík). Bakterie se poté uvolní do cytoplazmy hostitele a poté do prostředí, ve kterém budou muset přežít, někdy ve formě biofilmů, dokud nebude infikována nová hostitelská buňka.

Co dělat, abyste sledovali riziko legionel?

Pro sítě TV:

Co dělat, když je infikována síť ECS?

Existuje několik metod, které ministerstvo zdravotnictví testovalo a validovalo pro sítě pitné vody. Tyto metody se objevují v oběžníku 2002/243 zDuben 2002. Najdeme zejména:

Šok s peroxidem vodíku a stříbrem (H 2 O 2+ Ag), který spočívá v cirkulaci roztoku po síti a kontaminovaných místech (pokud se nepoužívá) v koncentraci v rozmezí od 100 do 1 000  mg / l peroxidu vodíku + ag po dobu kontaktu až do „12 hodin . Na konci doby kontaktu se provede úplné vyprázdnění sítě. Jednou z výhod této metody je zničení biofilmu.

Chlórový šok spočívá v získání koncentrace volného chloru 15  mg / l po dobu 24 hodin nebo 30 až 50  mg / l po dobu 2 až 3 hodin na úrovni zásobníků. Úplné vyprázdnění sítě se procvičuje po průchodu chlorované vody maximem nebo dokonce všemi místy použití.

Tepelný šok se provádí zvýšením teploty vody na 70  ° C po dobu 30 minut a voda musí proudit do všech bodů používání po dobu 5 až 10 minut nebo více při teplotě 65  ° C .

Rizika spojená s otřesy:

Sledování legionel

Pokud jde o TAR (chladicí věž nebo vzduchová chladicí věž) , cílem zákona o veřejném zdraví z roku 2004 bylo snížit počet případů legionel o 50% v období 2004–2008. Dekrety z roku 2004 se vyvinuly prostřednictvím dekretů z14. prosince 2013.

U sítí TV (teplá užitková voda) je nutné vycházet z objednávek1 st 02. 2010(kontrola a prevence znečištění sítí teplé vody legionellou. Zdá se logické sledovat améby (které jsou apriori indikátorem a rizikovým faktorem), ale legionely mohou existovat i bez améb a společná metoda detekce améb je drahá, časově náročné a ne všechny laboratoře jsou vybaveny tak, aby to dokázaly, takže se nepoužívá rutinně, ale je užitečné v případě nadměrné kontaminace po ošetření.

Monitorování proto postupuje ve Francii, kde se stala povinnou pro minerální vodu pro terapeutické použití (v tepelných zařízeních), ve vzduchových chladicích věžích, v jakékoli síti teplé vody ve zdravotnickém zařízení nebo v sociálních a lékařských zařízeních. -Sociální, hotely, turistické rezidence, kempy, vězeňská zařízení a nakonec všechny veřejné budovy se sprchami pro hromadnou přípravu teplé vody.
Na1 st 01. 2012, je tato povinnost rozšířena na další veřejně přístupná zařízení (ERP).
DGS a DGPR v roce 2009 uznaly, že kultivační metoda (povinná ve Francii) přináší po kultivaci zpoždění (je nutná kultivace minimálně 8 dní, i když jsou možné a v případě překročení mezi 3 a 3 roky je nutné poskytnout průběžné výsledky. 5 dnů), což je na újmu nejlepšímu řízení zařízení a optimalizaci lhůt pro zrušení omezujících opatření k využívání vody. Kromě toho nebere v úvahu všechny formy legionel, protože ve vodě je přítomna celá řada legionel a dalších životaschopných bakterií, které však neumíme kultivovat.
Ve stanovisku a zprávě (2011) z kolektivní expertízy ANSES byly vyhodnoceny metody detekce a počítání legionel ve vodě a byl učiněn závěr, že pouze dvě metody jsou „dostatečně relevantní a spolehlivé“  ; metoda regulační kultury (standard NF T90 431) a (rychlejší, ale není regulační v nařízeních ECS a TAR) kvantitativní PCR (standard NF T90 471).

V současné době neexistuje přenosný systém schopný provádět výčet Legionella.

Je povinné v sítích DHW a TAR prostřednictvím sanitárních karnetů nebo TAR ECS:

Bakteriologické monitorování je povinné (v nemocničním prostředí často prováděném biohygienickým technikem ):

Kromě mikrobiologických vzorků:

Ve zdravotnických zařízeních musí být postupy týkající se vodní sítě validovány CLINem zařízení. V případě výstrahy musí být informována správa a CLIN.

Ochrana

V případě technického zásahu do vodovodní sítě musí být personál chráněn před jakoukoli aerosolizací vody, zejména při práci na teplovodní síti. Nosit masku FFP3.

Rukavice jsou pro ochranu proti Legionella zbytečné. Legionelóza je přísně respirační infekce, neexistují žádné kožní infekce Legionella .

Bakteriologie

Bakterie rodu Legionella jsou gramnegativní bacily (ale zřídka viditelné při přímém vyšetření), jsou mobilní (1 nebo 2 polární bičíky ), přísná aerobní , slabě pozitivní kataláza . Jejich stěna má tu zvláštnost, že obsahuje rozvětvené nenasycené mastné kyseliny. Tyto bakterie jsou obzvláště náročné a lze je kultivovat pouze na speciálních médiích obsahujících cystein a železo, jako je médium CYE ( dřevěné uhlí , kvasnicový extrakt ), médium GVPC nebo médium BCYE ( pufrovaný kvasnicový extrakt uhlí s cysteinem, železem a aktivním uhlím). Aktivní, černě zbarvené médium, aby se zabránilo volným radikálům zabíjet legionely in vitro .

BMPA alfa

Jedná se o kultivační médium používané pro selektivní izolaci legionel; nazývá se také agar Legionella

Vyhlášky, které regulují riziko legionel v zařízeních

Poznámky a odkazy

  1. (in) Farhat M Trouilhe TM Brand E Moletta-Denat M Robine E, Brother J, „Vývoj pilotní škály 1 pro eliminaci legionel v biofilmu v horkovodní síti: hodnocení ošetření tepelným šokem“ Journal of Applied Microbiology 2010; 108: 1073 -1082
  2. (in) Kuiper MW Wullings BA, ADL Akkermans, RR Beumer, Van der Kooij D, „Intracelulární proliferace Legionella pneumophila u Hartmannella vermiformis ve vodních biofilmech je pěstován plastifikovaný polyvinylchlorid“ Appl Microbiol Přibl . 2004; 70: 6826-6833
  3. (in) Bouyer S, C Imbert, Rodier MH Héchard Y, „Dlouhodobé přežití Legionella pneumophila spojené s vezikuly Acanthamoeba castellanii “ Přibližně Microbiol . 2007; 9: 1341-1344.
  4. (in) Brieland J, M McClain, LeGendre M, Engelberg C, „Intrapulmonální Hartmannella vermiformis potenciální výklenek pro replikaci Legionella pneumophila v myším modelu legionelózy“ Infect Immun . 1997; 65: 4892-4896.
  5. (in) Baron PA, Willeke K „Dýchací kapičky z vířivek: měření distribuce velikosti a odhad potenciálního onemocnění“ Přibližně Res . 1986; 39: 8-18.
  6. Bollin GE, Plouffe JF, Para MF, Hackman B (1985) Aerosoly obsahující Legionella pneumophila generované sprchovými hlavicemi a teplovodními faucety. Aplikovaná a environmentální mikrobiologie 50, 1128-1131.
  7. (v) Krása J Zucs P, de Jong B; European Legionnaires 'Disease Surveillance Network a kol. (77), „  Legionnaires disease in Europe, 2009-2010  “ , Euro Surveill , sv.  18, n o  10,2013, str.  20417. ( PMID  23515061 , číst online [html] )
  8. Přehled případů legionelózy, ke kterým došlo ve Francii v roce 2013 na webu Invs
  9. (in) Declerck P (2010) „Biofilmy: hřiště životního prostředí Legionella pneumophila“ Přibližně Microbiol. 12, 557-566.
  10. (in) Lee HJ, Ho MR, Bhuwan M, Hsu CY, Huang MS, Peng HL, Chang HY (2010) „Zlepšení detekce bakterií a biofilmu na bázi ATP enzymatickou regenerací pyrofosfátu“ Analytical Biochemistry 399, 168-173
  11. (in) Murga R Forster TS, Brown E, Pruckler JM Fields BS, Donlan RM (2001) „Role biofilmů v přežití Legionella pneumophila v modelu systému pitné vody“ Microbiology 147, 3121-3126.
  12. (in) Moritz M. Flemming HC Wingender J (2010) „Integrace Pseudomonas aeruginosa a Legionella pneumophila do biofilmů pitné vody pěstovaných v jednom domácím instalatérském materiálu“ Int J Hyg Environ Health 213, 190-197.
  13. (in) Rogers J Dowsett AB, Dennis PJ, Lee JV, Keevil CW (1994) „Vlivem teploty a výběru instalatérského materiálu je tvorba biofilmu a růst Legionella pneumophila v modelovém systému pitné vody obsahující komplexní mikrobiální flóru“ Aplikované a environmentální Microbiology 60, 1585-1592.
  14. (in) Van der Kooij D Veenendaal HR WJH Scheffer (2005) „Tvorba biofilmu a množení legionel v modelovém systému s teplovodními trubkami z mědi, nerezové oceli a zesítěného polyethylenu“ Water Research 39, 2789-2798
  15. (in) Barer MR, Smith RJ, PR Cooney, Kimmitt PT (2000) „Vztahy mezi kultivovatelností, aktivitou a virulencí v patogenních bakteriích“ J Infect.Chemother. 6, 108-111
  16. (in) Abu Kwaik Y, Gao LY, BJ Stone, Venkataraman C. Harb OS (1998) „Invaze prvoků Legionella pneumophila a její role v bakteriální patogenezi a ekologii“ Appl.Environ.Microbiol. 64, 3127-3133
  17. (in) Berk SG, Ting RS Turner GW Ashburn RJ (1998) „Produkce dýchatelných vezikul obsahujících živé buňky dvěma Legionella Acanthamoeba spp. » Appl.Environ.Microbiol. 64, 279-286.
  18. ODPOVÍDÁ stanovisko a zprávu o stanovení počtu legionel ve vodě; Anses, publikováno: 18. července 2011
  19. (in) Campese C, D Bitar, Jarraud S, Maine C, F Forey, Stephen J, Desenclos AD Saura C. Che D. (2010) „Pokrok v monitorování a kontrole infekce Legionella ve Francii 1998-2008“ Int J Infect Dis.
  20. Laurent Radisson, „Legionella in water: ANSES uvádí metody detekce“ Bulletin d'Actu-Environnement  ; 10. srpna 2011
  21. (in) Byrd JJ, Xu HS, Colwell RR (1991) „Životaschopný cíl nekultivovatelných bakterií v pitné vodě“ Appl Microbiol Přibl. 57, 875-878.
  22. (in) Ballard AL Fry NK Chan L Surman SB, Lee JV, TG Harrison, KJ Towner (2000) „Detection of Legionella pneumophila using the Real-Time PCR Hybridization Assay“ J. Clin. Microbiol. 38, 4215-4218
  23. Vyhláška ze dne 14. prosince 2013 o obecných požadavcích na zařízení spadající do registračního režimu pod číslem 2921 nomenklatury zařízení klasifikovaných z důvodu ochrany životního prostředí ( číst online )

Podívejte se také

Související články

externí odkazy

Bibliografie

  1. Olivier Dauptain, Guide Comparative des decres 2004-2014 - Evolution of section 2921 - Legionella risk management on Cooling Towers - spoluautor s P.Rambeau , Francie, vydání Anexo ,2014, 60  s. ( ISBN  978-2-9548250-0-7 )