Chromatografie na papíře

Papírová chromatografie je technika planární chromatografie, při které je mobilní fáze kapalná .

Pracovní režim

K provedení takové separace se malé množství roztoku (roztoků), které mají být analyzovány, nanese na okraj proužku chromatografického papíru. Tento vzorek je adsorbován papírem; což znamená, že molekuly s ním interagují a že budou mít tendenci zůstat na stejném místě.

Papír se poté namočí do rozpouštědla (eluentu), jako je směs voda / ethanol, a umístí se do uzavřené nádoby. Když rozpouštědlo (eluent) stoupá podél papíru kapilárním působením, narazí na vzorek a odnese ho.

Různé látky tvořící vzorek migrují různými rychlostmi v závislosti na tom, zda s papírem interagují více či méně silně.

Chromatografie na papíře trvá nějakou dobu (obvykle několik hodin). Jakmile je operace dokončena, obvykle když čelo rozpouštědla (eluent) téměř dosáhlo horní části papíru, papír se vyjme z nádrže a rozpouštědlo se nechá odpařit. Výsledek se nazývá chromatogram .

Chromatogram se používá ke srovnání s jinými analýzami prováděnými na známých látkách a prováděnými za stejných podmínek k identifikaci látek ve vzorku. Látky lze identifikovat výpočtem hodnoty čelního poměru (Rf), kterou lze porovnat s hodnotami uvedenými v tabulkách. Tato hodnota se vypočítá takto: Rf = (vzdálenost uražená vzorkem) / (vzdálenost uražená rozpouštědlem)

Existuje několik způsobů, jak určit umístění oddělených produktů:

  1. výrobky jsou barevné, není třeba nic zvláštního dělat.
  2. výrobky jsou fluorescenční a lze je identifikovat pod ultrafialovou lampou .
  3. v opačném případě bude nutné použít vývojku, která bude chemicky reagovat s produkty (ničí je) a jejichž výsledek bude zbarven.

Dvojrozměrná chromatografie na papíře

K oddělení komplexních směsí podobných látek může být užitečné použít dvourozměrnou chromatografii . To se provádí ve dvou fázích, mezi kterými se mění rozpouštědlo a papír se otáčí o 90 °. Interakce vyvinuté novým rozpouštědlem se budou lišit, což upraví separaci v této druhé dimenzi a umožní lepší celkovou separaci.

Mikropreparativní papírová chromatografie

Chromatografie na papír může být také mikro- preparativní technika  : obnovit produkty takto oddělené jsou části papíru, na kterém se nacházejí jsou vystřižené a adsorbované látky se poté znovu rozpustí. Zpětně získatelné částky jsou řádově miligram nebo méně.

Dějiny

Objev chromatografie na papíře v roce 1943 Martinem a Syngeem poprvé umožnil oddělit složky rostlin umožňující jejich identifikaci. Po roce 1945 došlo v této oblasti k rychlému rozvoji výzkumné činnosti.

Reference

  1. (v) "  planární chromatografie  " Compendium of Chemical terminologie [ "  Gold Book  "], IUPAC 1997, opravené znění on-line (2006), 2 th  ed.
  2. (in) Haslam Edwin, 2007. Rostlinný tanin - lekce na celý život fytochemikálie. Phytochemistry, sv. 68, číslo 22–24, strany 2713–2721, PMID 18037145 .