Histopatologie je botanická nebo zdravotnické disciplíny určeny k vytvoření diagnózu mikroskopickým studiem tkání (živých nebo mrtvých).
Stále je nejpoužívanějším nástrojem v anatomo-patologii ; rutinně pro klinickou diagnostiku rakoviny a dalších nemocí.
Slovo histopatologie pochází z řeckého histos (tkáně) a patosu (utrpení).
Týká se pozorování v mikroskopickém měřítku živé nebo mrtvé tkáně s cílem identifikovat mechanismy, stopy nebo histologické indexy projevů nemocí (virových i jiných).
V klinické medicíně se histopatologie týká zejména vyšetření biopsií nebo chirurgických vzorků .
Histopatologické vyšetření tkání začíná odstraněním tkání ( chirurgický zákrok , biopsie nebo pitva ). Tkáň se odstraní z organismu nebo rostliny a obvykle se umístí do biocidního laku na vlasy , který tkáň stabilizuje, aby se zabránilo jejímu rozkladu . Nejběžnějším fixátorem je formalin (10% formaldehyd zředěný ve vodě). Osoba odebírající vzorek je opatrná, aby jej neznečistila prachem, mikroby nebo nežádoucími látkami.
Odebraný vzorek tkáně je připraven histologickými metodami tak, aby byl pozorovatelný pod mikroskopem .
Je ponořen do nádoby navržené tak, aby umožnilo činidlům proniknout do tkáně. Je ponořen do po sobě jdoucích lázní stále více koncentrovaných v ethanolu , což vede k jeho úplné dehydrataci. Vzorek se poté ponoří do toluenu nebo xylenu (opatrně, protože jsou to toxické produkty). Poté je nakonec ponořen do konzervační látky (často roztaveného parafínu ). Během těchto 12 až 16 hodin umožnil proces parafinu nahradit vodu v tkáních, což vzorek fixuje, ale odlišuje se od původní tkáně. Výsledný obraz proto bude muset „interpretovat“ odborník.
Takto připravené tkáně se poté vyjmou z přípravné kazety a umístí se do formy, do které se nalije parafín, který se při ochlazení usadí v bloku.
Řezáním velmi tenkých plátků (2 až 7 mikrometrů tlustých) tohoto bloku pomocí mikrotomu se získají plátky biologické tkáně, které jsou tenčí než průměrná tloušťka buňky. Tyto řezy jsou umístěny na skleněném sklíčku a volitelně vystaveny barvení jedním nebo více pigmenty, jejichž afinita k určitým buněčným složkám odhalí určité struktury nebo anomálie. Barvení také zlepšuje kontrast obrazu pozorovaného pod mikroskopem.
Nejčastěji používaná barviva v histopatologii kombinují dva pigmenty;
Byly vyvinuty stovky dalších technik pro selektivní barvení určitých buněčných nebo tělesných prvků (např. Safranin , olejová červeň O , konžská červeň , soli stříbra a různá umělá barviva.
Histochemie zahrnuje různé techniky, za použití chemických reakcí mezi chemických a biologických složek tkáně. Například běžnou histochemickou technikou je použití pruské modři (skvrna Perl), která například vykazuje usazeniny železa v zrnu rýže nebo při onemocněních, jako je hemochromatóza .
V poslední době se protilátky používají k selektivnímu tónování proteinů , tuků a sacharidů . Tato technika známá jako imunohistochemie značně vylepšila potenciál pro studium buněk pod mikroskopem.
Další pokročilé techniky, zejména „hybridizace in situ“ nebo inspirované genetickým inženýrstvím, umožňují identifikovat molekuly DNA nebo RNA .
Digitální fotoaparáty se stále více používají k zachycení histopatologických pohledů.
Histologické přípravky jsou vyšetřovány pod mikroskopem odborným lékařem (nebo laboratorním technikem kvalifikovaným v oboru botaniky nebo plísní)
Tato lékařská diagnóza je formulována ve zprávě, která popisuje výsledek a názor lékaře. V případě rakoviny bude mít tato histopatologická diagnóza velký význam pro výběr protokolu léčby (radiologie, chemoterapie, resekce atd.).
Histochemie zvířat a cytochemii: Principles and Methods, L. Lison, 3 th vydání, ed Gauthiers Villars, 1960.