Test mikrojader

Mikrojádra testu (nebo mikrojader počet zkouška ) je široce používán ekotoxikologické nebo biomonitoring testu , založený na detekci a počítání mikrojader v buňkách exponovaných (obvykle in vitro ) na genotoxický činidlo nebo existuje podezření, že takový. Připomínáme, že mikrojader je v živé buňce , „falešném jádru“, které se abnormálně tvoří během dělení buněk . Pokud nezpůsobil buněčnou smrt ( apoptózou ), bude přetrvávat po celou dobu životnosti buňky a obvykle je spojen s mutagenním účinkem, a někdy karcinogenní . Přítomnost mikrojader naznačuje, že buňka byla vystavena jednomu nebo více genotoxickým a klastogenním činidlům ( tj. Odpovědným za zlomy ve dvouřetězci molekuly DNA ) nebo „aneugenickému“ činidlu (tj. Změně mitotického aparátu, který umožňuje dělení buněk).


Mikrojaderný test je jednou z variací testu abnormality chromozomů . Zejména umožňuje posoudit nedávnou expozici (hodiny, dny).

Aplikace

Jejím cílem je posoudit genotoxický potenciál sloučeniny nebo ukázat expozici mutagennímu činidlu. Má a má mnoho konkrétních použití:

Může být použit na všechny typy cílových buněk (buněk, močového měchýře, intraorální buňky, fibroblasty , keratinocyty ,  atd ), a to i na rostlinných buňkách.

Používá se zejména na T lymfocyty v kultuře (modelové buňky); pak můžeme spočítat počet mikrojader viditelných v dvojjaderných T lymfocytech získaných blokováním cytoplazmatického dělení cytochalasinem B po úplném dělení jader, s výhodou počítání pouze dědičných genotoxických lézí (mikrojader v jediných dvoujaderných lymfocytech), pouze léze striktně splňují definici genetické mutace .

To může také být aplikován na vzorku buněk exponovaných in vivo (např lymfocyty z pokusných zvířat nebo lidí potenciálně vystavených výrobku genotoxického ).

Užitečný doplněk

Test může být užitečně doplněn studiem typu a kvality „genetického materiálu“ uzavřeného v mikronukleu (existují centromery  ?, Jaký typ chromozomu se tam mění?, S jakým typem chromozomu? Alterace?).

To umožňuje fluorescenční in situ hybridizační technika (technika FISH). Můžeme tak lépe porozumět fungujícím mechanismům: například přítomnost centromer v mikrojaderách by měla naznačovat aneugenický účinek, zatímco jejich nepřítomnost směřuje spíše ke klastogennímu účinku ).

Výhody / nevýhody, omezení

Výhody

Test je snadno proveditelný, detekuje klastogenní i aneugenické účinky a je rychle interpretovatelný; a analýza buňka po buňce umožňuje získat velké množství užitečných dat pro dobré statistické zpracování výsledků.

Nevýhody, omezení


Na počátku dvacátých let byl mechanismus vysvětlující, proč byly tyto faktory matoucí (zejména u tabáku), stále nedostatečně pochopen a kontroverzní.

Standardy ...

Mikronukleární zkouška je předmětem pokynu OECD pro testování chemických látek, ovšem platí pouze pro erytrocyty ze savců (linka 474).

Poznámky a odkazy

  1. Bonassi S, Znaor A, Ceppi M, Lando C, Chang WP, Holland N, Kirsch-Volders M, Zeiger E, Ban S, Barale R, Bigatti MP, Bolognesi C, Cebulska-Wasilewska A, Fabianova E, Fucic A, Hagmar L, Joksic G, Martelli A, Migliore L, Mirkova E, Scarfi MR, Zijno A, Norppa H a Fenech M (2007) Zvýšená frekvence mikrojader v lymfocytech periferní krve předpovídá riziko rakoviny u lidí. Carcinogenesis 28: 625-631.
  2. O. FARDEL, L. VERNHET, V. NOUVEL, A.-V. JUNG & A. LEGRAND-LORANS (2009), RECORD Report; Použití testů genotoxicity pro monitorování expozice pracovníků v nakládání s odpady a recyklace průmyslu , 163 str., N O  07-0667 / 1A.
  3. Gauthier, L. (1989). Studium genotoxické síly povrchové vody, pitné nebo upravené, tvorbou mikrojader v mloku Pleurodeles waltl; Disertační práce, Toulouse 3; ( shrnutí ).
  4. L. Gauthier a Y. Lévi , „  Aplikace tritonového mikronukleového testu na přímé studium genotoxicity procesů dezinfekce vody  “ , v časopise Journal français d'hydrologie ,1990( ISSN  0335-9581 , DOI  10.1051 / voda / 19902101147 , konzultováno 29. září 2020 ) ,s.  147–157
  5. Výměny Narod SA, Neri L, Risch HA a Raman S (1988) Lymfocyty s mikrojaderami a sesterskými chromatidy mezi zaměstnanci kanadské federální laboratoře. Am J Ind Med 14: 449-456.
  6. Sari-Minodier, I., Orsiere, T., Auquier, P., Pompili, J., & Gelin, C. (2001). Test mikrojader při hodnocení mutagenního rizika: studie 10 zaměstnanců vystavených formaldehydu. Archiv nemocí z povolání a lékařství z povolání, 62 (2), 75-82.
  7. Brahem, A., Bouraoui, S., ElGhazel, H., Amor, AB, Saad, A., Dabbebi, F., a Mrizek, N. (2011). Hodnocení genotoxického rizika v anatomopatologické laboratoři mikronukleovým testem. Archiv nemocí z povolání a životní prostředí, 72 (4), 370-375.
  8. Danièle Valadaud-Barrieu , „„  Mikronukleový indukční test “na Allium sativum; diferenciace klastogenních a mitoklastických látek  “ , na Mutation Research Letters ,1 st 01. 1983( ISSN  0165-7992 , DOI  10.1016 / 0165-7992 (83) 90037-4 , konzultováno 29. září 2020 ) ,s.  55–58
  9. Florence Duffaud , Thierry Orsière , Laurence Digue a Roger Favre , „  Zájem o mikronukleový test u binukleovaných T lymfocytů v kultuře pro detekci genotoxické události u pacientů s rakovinou  “, Bulletin du Cancer , sv.  85, n o  3,23. března 1998( ISSN  0007-4551 , číst online , konzultováno 29. září 2020 )
  10. Mateuca R, Lombaert N, Aka PV, Decordier I a Kirsch-Volders M (2006) Chromozomální změny: indukce, metody detekce a použitelnost v biomonitoringu člověka. Biochemistry 88: 1515-1531
  11. Lewinska D, Palus J, Stepnik M, Dziubaltowska E, Beck J, Rydzynski K, Natarajan AT a Nilsson R (2007) Frekvence mikrojader v lymfocytech periferní krve a bukálních sliznicích pracovníků tavírny mědi, se zvláštním ohledem na expozici arzenu. Int Arch Occup Environ Health 80: 371-380.
  12. Iarmarcovai G, Bonassi S, Botta A, Baan RA a Orsiere T (2007) Genetický polymorfismus a mikrojader formace: Přehled literatury. Mutat Res.
  13. Nersesyan AK (2006) Vyvolává kouření cigaret mikrojader v bukálních buňkách? Am J Clin Nutr 84: 946-947; odpověď autora 947-948
  14. Kroning F. Uber die induktion von leukamien bei C57 R1 mausen nach pinselung einer dorsalen hautpartie mit kurzkettigen fettsauren, fettsaureestern und mit squalen. Acta Unio Intern Contra Cancrum 1959; 15: 619-26.
  15. Bartfai, E., Orsière, T., Duffaud, F., Villani, P., Pompili, J., & Botta, A. (2000, říjen). Studium genotoxického účinku surových jaterních olejů ze tří druhů středomořských žraloků pomocí testu počtu mikronukleů v lidských T lymfocytech. In Annales de Biologie Clinique (sv. 58, č. 5, str. 595-600) ( abstrakt ).
  16. Buranudeen F, Richards-Rajadurai PN. Skvalen. Infofish Marketing Digest 1986; 1: 42-3
  17. Bolognesi C, Parrini M, Poggieri P, Ercolini C, Pellegrino C. Karcinogenní a mutagenní znečišťující látky: dopad na mořské organismy. Sborník workshopů FAO-UNEP-IOC o biologických účincích znečišťujících látek na mořské organismy 1992; 69: 113-21.

Podívejte se také

Bibliografie

Související články